《乳及乳制品中牛羊源性成分定性檢測方法 實(shí)時(shí)熒光PCR法》和《乳及乳制品中牛乳酪蛋白成分定性檢測 毛細(xì)管凝膠電泳法》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)問答

1.兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)制定的主要目的和意義是什么？  

《食品安全法》中明確規(guī)定，禁止生產(chǎn)經(jīng)營“摻雜摻假”食品，由于山羊乳、綿羊乳、牦牛乳、水牛乳等特色乳的數(shù)量和日產(chǎn)量比較小，價(jià)格偏高，在經(jīng)濟(jì)利益的驅(qū)動(dòng)下，有些不法商販和企業(yè)在特色乳中摻入牛乳以降低成本，牟取暴利，且各種乳成分接近，性質(zhì)相似，在特色乳中摻入一定量的牛乳很難從感官及常規(guī)指標(biāo)上檢測出來。這不僅僅涉及經(jīng)濟(jì)、營養(yǎng)價(jià)值和食品安全等問題，更直接影響著消費(fèi)者的權(quán)益，而且容易引起過敏等健康風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)也擾亂了市場的秩序，制約了羊乳等特色乳產(chǎn)業(yè)的的正常發(fā)展。

另外，為加強(qiáng)對(duì)嬰幼兒配方粉等特殊食品的監(jiān)管力度，2016年6月，國家食品藥品監(jiān)督管理總局頒布了《嬰幼兒配方乳粉產(chǎn)品配方注冊(cè)管理辦法》，規(guī)定“產(chǎn)品名稱中有動(dòng)物性來源的，應(yīng)當(dāng)根據(jù)產(chǎn)品配方在配料表中如實(shí)標(biāo)明使用的生乳、乳粉、乳清（蛋白）粉等乳制品原料的動(dòng)物性來源。使用的乳制品原料有兩種以上動(dòng)物性來源時(shí)，應(yīng)當(dāng)標(biāo)明各種動(dòng)物性來源原料所占比例”。

為保障羊乳等特色乳及其產(chǎn)品品質(zhì)，確保生產(chǎn)廠家及消費(fèi)者的利益，亟待建立簡便、快速、準(zhǔn)確的檢測乳及入乳制品中乳源的技術(shù)體系，特制定這兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)，并于2020年由中國營養(yǎng)保健食品協(xié)會(huì)立項(xiàng)。

2.《乳及乳制品中牛（家牛、牦牛和水牛）和羊（山羊和綿羊）源性成分定性檢測方法實(shí)時(shí)熒光PCR法》與現(xiàn)有牛羊源性成分檢測方法有什么區(qū)別？

本標(biāo)準(zhǔn)是專門針對(duì)乳及乳制品建立的，規(guī)定了從樣品前處理、DNA提取方法、乳源物種檢測以及結(jié)果判定等方面的標(biāo)準(zhǔn)操作流程，適用于乳及其制品中牛（家牛、牦牛和水牛）、羊（山羊和綿羊），以及家牛、牦牛、水牛、山羊、綿羊源性成分的定性檢測，適用的產(chǎn)品類別包括液態(tài)乳（巴氏殺菌乳、高溫殺菌乳、調(diào)制乳、滅菌乳、發(fā)酵乳），乳粉（全脂乳粉、脫脂乳粉、部分脫脂乳粉、調(diào)制乳粉、乳清粉），嬰幼兒配方乳粉等。

目前現(xiàn)有的標(biāo)準(zhǔn)僅規(guī)定了牛羊源性成分檢測方法，涉及樣品前處理、DNA提取方法不適應(yīng)于乳及乳制品，且本標(biāo)準(zhǔn)的物種涉及牛（家牛、牦牛和水牛）、羊（山羊和綿羊），以及家牛、牦牛、水牛、山羊、綿羊7種乳源物種成分實(shí)時(shí)熒光PCR法，適用范圍和應(yīng)用領(lǐng)域更廣。

同時(shí)考慮到嬰幼兒配方粉中乳配料可能引入牛源的問題，因此本標(biāo)準(zhǔn)在建立牛（家牛、牦牛和水牛）以及家牛檢測方法時(shí)，既要考慮方法的特異性、靈敏度，同時(shí)還需兼顧不能檢出由于乳配料可能引入牛源成分的問題，因此在標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定了待檢樣品DNA濃度、上樣量、判定閾值等，為避免誤判奠定了基礎(chǔ)。

3.如何通過這兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)檢測羊乳制品中是否含有牛乳成分？

針對(duì)羊乳及乳制品檢測時(shí)，首先采用《乳及乳制品中牛（家牛、牦牛和水牛）和羊（山羊和綿羊）源性成分定性檢測方法實(shí)時(shí)熒光PCR法》作為初篩方法，采用本標(biāo)準(zhǔn)建立的牛（牛、水牛和牦牛）或家牛乳源成分對(duì)樣品中牛源性成分進(jìn)行檢測。若未檢出牛基因成分，則判定羊乳制品中不含有牛乳成分；如檢出牛基因成分，則進(jìn)一步采用標(biāo)準(zhǔn)《乳及乳制品中牛乳酪蛋白成分定性檢測毛細(xì)管凝膠電泳法》確證產(chǎn)品的蛋白成分來源，判定牛基因檢測陽性的樣品是否含有來源于牛乳酪蛋白，進(jìn)而對(duì)樣品的真實(shí)性進(jìn)行判定，兩種方法聯(lián)合檢測解決了以往乳制品檢測中因配料復(fù)雜、乳源判別困難的瓶頸問題，技術(shù)路線圖如下圖1所示：

4.《乳及乳制品中牛（家牛、牦牛和水牛）和羊（山羊和綿羊）源性成分定性檢測方法實(shí)時(shí)熒光PCR法》中規(guī)定了多種乳源的檢測方法，在實(shí)際檢測的過程中如何選擇用哪個(gè)乳源引物探針進(jìn)行檢測？

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了乳及其制品中牛（家牛、牦牛和水牛）、羊（山羊和綿羊）源成分，以及家牛、牦牛、水牛、山羊、綿羊單一乳源成分的實(shí)時(shí)熒光PCR定性檢測方法，在實(shí)際檢測的過程中，可根據(jù)樣品標(biāo)簽的乳源標(biāo)識(shí)選擇相應(yīng)的引物探針，可參考下表列舉的可能性產(chǎn)品例子，包括但不限于此表：

表1乳及乳制品中乳源及摻雜成分檢測舉例