新國標中有幾個問題得到了盧老師的回答，感謝盧老師和大弟子的幫忙，由于前段時間忙，所以到現在才發上來和大家一齊分享。當時跟盧老師是通過電話溝通，可能轉述有不完整或不妥當的地方，希望盧老師指正。也希望其他論壇的大蝦一齊討論。

    1.菌落總數：6.2.2提到可以覆蓋一層瓊脂以防蔓延菌的生長，但這樣會不會影響專性需氧菌的生長？
答：有一點影響，但是影響不大。因為4mL的瓊脂厚度不大，氧氣還可以滲透進去。

    2.LST肉湯和BGLB肉湯分裝為10mL，這個量是不是個規定值？和稀釋度有關系嗎？
問這個問題主要是我們一直的做法都是隨意加，就算03年乳糖膽鹽規定分裝的毫升數，但是我們一直沒有按規定的量執行。
答：如果分裝不按規定的量，加上樣液后，肉湯的濃度就會改變，會影響抑菌的效果。

    3.雙岐桿菌菌落計數需要做革蘭氏染色和過氧化氫酶試驗，但新標準里沒有了詳細說明，是不是還按舊標準挑5個可疑菌落做鑒定？做革蘭氏染色的適合是挑48h培養物，那樣會不會有革蘭氏不定型的情況出現？
答：挑5個或10個做染色和過氧化氫酶都可以，似乎菌落的多少而定，多的就取多點。雙岐桿菌染色本來就陰性和陽性會同時存在，雙岐桿菌培養會不停的產酸，可能有些會死掉。

    4.乳酸菌的菌落計數分成不同菌采用不同的培養基和培養條件，但如果樣品中幾種菌都有，那就需要全部培養基都用上，那么最后的結果應該怎樣計算？
答：取最大值的那個進行計數。兼性厭氧條件下生長的在厭氧條件下生長的更好。

    5新的標準中涂布的都規定了用L形涂布棒，那為什么不能用三角形呢？兩者有什么區別嗎？
答：都可以用，不是原則問題。

    6.大腸桿菌在VRB-MUG平板上描述為發藍色熒光的菌落，是菌落發熒光嗎？還是菌落周圍發熒光？我做了幾次實驗都是菌落周圍發熒光，咨詢環凱、陸橋的也說是菌落周圍發熒光。
答：這個是理解的問題，該熒光物質是水溶性的，菌落分解出熒光物質后會擴散到培養基中。

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